Ambientata per la sesta volta nella città umbra di Spoleto, vede l'uscita di scena, alla fine della prima puntata, dei co-protagonisti delle precedenti tre stagioni, il Capitano Anna Olivieri (Maria Chiara Giannetta) e il PM Marco Nardi (Maurizio Lastrico), che si trasferiscono a Roma subito dopo la celebrazione del loro matrimonio. A prendere il loro posto sono, rispettivamente, il nuovo Capitano Diego Martini (Eugenio Mastrandrea) e la nuova PM Vittoria Guidi (Gaia Messerklinger). Altre novità sono l'arrivo a Spoleto di Giulia Mezzanotte (Federica Sabatini), sorella di Don Massimo (Raoul Bova), e lo sporadico ritorno dell'ex Capitano Giulio Tommasi (Simone Montedoro) accompagnato da sua figlia Martina (Roberta Volponi), ormai adolescente.